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PDA試管導致瓊脂不能完全凝固的幾種原因 | |||
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瓊脂:英文名稱為agar,食用菌母種PDA培養基中的A指的就是瓊脂,是用海產的麒麟菜、石花菜、江蘺等制成的植物膠,因主要來自海南,故稱為“瓊脂”。瓊脂是食用菌母種培養基必須使用的一種物質,起到固定培養基斜面的作用,菌絲并不能夠利用瓊脂的營養。
進入6月后,經常有朋友問制作的PDA培養基,瓊脂的添加量和以前一樣,為什么現在不能完全凝固了?瓊脂在PDA培養基中添加量是2%,就是1000ml培養基加入瓊脂20克,我們分析一下有幾種原因導致瓊脂不能完全凝固。
1滅菌過度
滅菌效果由溫度和時間兩個參數決定,PDA試管培養基的滅菌溫度是121℃,時間是20-30min,如果兩個參數有一個超出,就很容易引起瓊脂不凝固。
解決辦法:PDA試管培養基滅菌時間121℃,30min即可。對于液體培養基的滅菌溫度121℃是足夠的,為了保證滅菌效果將滅菌溫度提高到125℃的做法是錯誤的。
2瓊脂添加量少
瓊脂添加量小于2%,或者稱量不準確導致瓊脂不凝固。
解決辦法:保證瓊脂添加量2%,校正天平,保證稱量準確。
3瓊脂質量差
使用劣質,或者長期存放的瓊脂可能會導致瓊脂不凝固。
解決辦法:使用優質瓊脂,有條件的一定要使用瓊脂粉,瓊脂條是食品添加劑,瓊脂粉是實驗試劑,質量可靠。
4加水量不準
配置培養基時,加水過多會導致瓊脂不凝固。
解決辦法:加水準確,以及熬制后重新稱量,稱量要用量筒,或者校正過的燒杯。
5分裝時瓊脂沉淀
在分裝時,如果瓊脂沒有完全溶解,就很容易出現沉淀的情況,這樣先分裝的瓊脂濃度就低,出現不能完全凝固的情況。
解決辦法:做到完全溶解,同時邊攪拌,邊分裝,均勻一致。
6pH值過低
pH值低于4.5,培養基酸化,瓊脂會不凝固。
解決辦法:引起PDA培養基酸化的原因主要是水的ph,所以盡量使用桶裝水,桶裝水呈弱堿性,而且穩定。
7環境溫度高
夏天,一些沒有空調的工廠,制作好的PDA培養基因環境溫度過高而導致不能完全凝固。
解決辦法:在夏季可以將1000ml培養基的添加比例提高到22克,如果需要添加到30克才能夠凝固,說明瓊脂質量有問題了。有條件的可以安裝空調。
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