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細胞增殖新的工具以確定細胞分裂 | |||
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細胞增殖,可能會發生許多刺激如細胞因子的曝光或多種其他進程。BD有一個新的產品,以幫助研究人員研究細胞增殖。空?紫擴散染料450,用于檢測細胞的增殖與紫色激光,這有利于使用較大的面板。這使得更多的數據從有限樣本使用多色流式細胞儀測定。
VPD450是一個非熒光酯化染料。酯基使染料進入細胞。一旦染料是在細胞內的酯酶裂開關閉酯基的染料轉換成熒光的產品,它在細胞內和陷阱。復制事件與每個單元格中的染料量下降,導致的特征模式。 的進行一系列設計用于增殖細胞的檢測通過測量溴脫氧尿苷(BrdU)標記,用于測量從頭DNA合成的DNA前體胸腺嘧啶核苷類似物的抗體和試劑盒。
工具和技術來研究細胞增殖過程中的細胞周期的S期(DNA合成)的BrdU結合到新合成的DNA,并可以很容易地檢測到抗BrdU特異性抗體。BD的BrdU檢測而設計的抗體和試劑盒可用于兩種細胞的流式細胞儀和免疫組化,包括BD地平線?V450和PERCP-CY?5.5格式。除了增加的DNA,某些蛋白質水平作為細胞增殖的結果也隨之上升。例如,Ki67的是在細胞核分裂細胞表達的抗原。然而,在G0期的細胞周期,它是未檢出。Ki67蛋白可以結合其他增殖標志物,如以增加信心的BrdU和VPD450。這些標記也可以結合細胞表面和其他類型的標記,獲得細胞亞群,其信號轉導途徑有關的其他信息。
隨著細胞的損壞或不再需要時,它們經受細胞凋亡或程序性細胞死亡過程中發生的胚胎發育和維持組織穩態正常的生理過程。
細胞凋亡是一個有組織的過程,標志著細胞自毀的細胞更新,或控制的異常細胞的生長。凋亡控制有序受損細胞死亡的壞死,而發生的組織損傷的結果,造成損壞和周圍的細胞的損失。
細胞凋亡過程的特點是某些形態特征。這些措施包括在質膜中的變化(如對稱膜和膜附著喪失的損失),細胞質和細胞核的縮合,蛋白質裂解和體間的DNA裂解。在最后階段的過程中,死亡的細胞變得支離破碎“凋亡小體”,并因此被淘汰被吞噬細胞周圍的細胞沒有明顯的炎癥損傷。
然而,某些類型的細胞不顯示細胞凋亡的特征。在這些情況下,可能需要進行分析,以確認細胞死亡機制的細胞凋亡的多個方面。
技術研究凋亡細胞程序性死亡為了支持這個頻譜的要求, 提供全方位的凋亡檢測工具和技術測量指標在細胞凋亡過程的不同階段跨越。 的工具,使用多種方法,包括流式細胞儀,生物成像和顯微(直播和固定細胞分析)以及ELISA,免疫組化,免疫印跡,熒光分光光度法。
AnnexinV的一個關鍵蛋白在細胞凋亡信號在質膜中的變化是在活細胞中檢測到的細胞凋亡過程的第一特征之一。細胞凋亡可以被檢測到的存在的磷脂酰絲氨酸(PS),這通常是位于質膜的胞質面。細胞凋亡過程中PS轉位到質膜外單張,并通過熒光標記的AnnexinV的結合鈣存在時,通過流式細胞儀和細胞成像可以檢測。
提供AnnexinV的幾種常見的格式,如FITC,PE和BD地平線?V450紫激光。此外,這些新格式,可開發更復雜的分析,看異構細胞亞群內的細胞凋亡。
由于細胞內的膜聯蛋白V如果質膜受到損害,也暴露,如7-AAD的膜-浸透染料是常用來區分凋亡細胞和死細胞,死細胞排除。人口與膜聯蛋白V染色的細胞,僅代表細胞凋亡的細胞群。
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