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| 血清學的檢測三種類別方法簡介 | |||
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血清學試驗由于其特異性強、靈敏度高、方法簡便，應用極為廣泛。目前，凡具有抗原性的物質，在沒有其他更簡便的方法進行測定時，幾乎都可以用血清學試驗方法來檢查。近年來在環境微生物檢測中，除常用的凝集試驗、沉淀試驗、補體結合試驗、中和試驗等方法外，瓊脂擴散法、免疫電泳法、免疫熒光技術和酶聯免疫技術等方法的應用也日趨廣泛。
血清學試驗檢測抗原或抗體的基本方法，可歸納為兩種類型，即用已知的抗體(如診斷血清)檢測未知抗原、或用已知的抗原(如診斷菌液)檢測未知抗體。
抗原抗體之間，有的在二者發生特異性結合之后，在一定條件的影響下，即可出現可見反應，這種試驗方法稱為直接試驗法，如常用的凝集試驗、沉淀試驗等；有的在二者發生特異性結合之后，并不直接表現為可見的反應，或反應不夠靈敏，需借助指示系統或載體使其表現為可見反應，這種試驗方法稱為間接試驗法。例如補體結合試驗，利用補體、紅細胞及溶血素作為指示系統，觀察溶血現象的發生與否；又如間接凝集試驗，將抗原或抗體吸附在載體如膠乳、紅細胞等顆粒的表面，使抗原抗體的結合反應通過載體發生的凝集表現出來。
近年來，迅速發展的免疫電泳和標記技術，使血清學試驗方法提高到新的水平。免疫電泳法將電泳技術和沉淀反應相結合，提高了試驗的特異性和靈敏度，應用熒光色素、酶及放射性同位素等與抗體(或抗原)結合來檢測抗原(或抗體)。
經典的血清學反應分三種類別：凝集反應、沉淀反應和補體結合反應。
一、凝集反應：顆粒性抗原（細菌、紅細胞等）與相應抗體結合，在電解質參與下所形成的肉眼可見的凝集現象，稱為凝集反應（Agglutination reaction）。其中的抗原稱為凝集原，抗體稱為凝集素。在該反應中，因為單位體積抗體量大，做定量實驗時，應稀釋抗體。
１）直接凝集反應
顆粒性抗原與相應抗體直接結合所出現的反應，稱為直接凝集反應(Direct www.atcc360.comagglution reaction)。
a.玻片凝集法。是一種常規的定性試驗方法。原理是用已知抗體來檢測未知抗原。常用于鑒定菌種、血型。如將含有痢疾桿菌抗體的血清與待檢菌液各一滴，在玻片上混勻，數分種后若出現肉眼可見的凝集塊，即陽性反應，證明該菌是痢疾桿菌。此法快速、簡便，但不能進行定量測定。
b.試管凝集法。是一種定量試驗方法。多用已知抗原來檢測血清中有無相應抗體及其含量。常用于協助診斷某些傳染病及進行流行病學調查。如肥達氏反應就是診斷傷寒、付傷寒的試管凝集試驗。因為要測定抗體的含量，故將待檢查的血清用等滲鹽水倍比稀釋成不同濃度，然后加入等量抗原，37℃或56℃，2~4小時觀察，血清最高稀釋度仍有明顯凝集現象的，為該抗血清的凝集效價。
２）間接凝集反應
將可溶性抗原（抗體）先吸附在一種與免疫無關的，顆粒狀微球表面，然后與相應抗體（抗原）作用，在有電解質存在的條件下，即可發生凝集，稱為間接凝集反應(Indirect agglutination)。由于載體增大了可溶性抗原的反應面積。當載體上有少量抗原與抗體結合。就出現肉眼可見的反應，敏感性很高。
二、沉淀反應：可溶性抗原與相應抗體結合，在有適量電解質存在下，經過一定時間，形成肉眼可見的沉淀物，稱為沉淀反應（Precipitation）。反應中的抗原稱為沉淀原，抗體為沉淀素。由于在單位體積內抗原量大，為了不使抗原過剩，故應稀釋抗原，并以抗原的稀釋度作為沉淀反應的效價。
１）環狀沉淀反應：是一種定性試驗方法，可用已知抗體檢測未知抗原。將已知抗體注入特制小試管中，然后沿管壁徐徐加入等量抗原，如抗原與抗體對應，則在兩液界面出現白色的沉淀圓環。 ２）絮狀沉淀反應：將已知抗原與抗體在試管（如凹玻片）內混勻，如抗原抗體對應，而又二者比例適當時，會出現肉眼可見的絮狀沉淀，此為陽性反應。 |
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